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Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 瓊脂糖

該 Thermo Scientific NAb 蛋白 A/G 離心試劑盒便于對各種樣品類型中的抗體進行快速、小規(guī)模親和純化。每個試劑盒都包括足夠用于純化至少 2 份抗體樣品的 NAb 蛋白 A/G 離心柱、收集管、緩沖液和簡化方案。

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖的特點：

•蛋白 A/G – 蛋白 A 和蛋白 G 的抗體結合結構域的固定化重組融合蛋白可對幾乎任何哺乳動物物種進行多克隆 IgG 純化
• 瓊脂糖樹脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法的較常用樹脂
• 惰性且穩(wěn)定 – *的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 A/G，因此非特異性結合較低且能夠多次使用而不降低得率
• 標準容量 – Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 A/G，提供大于 7 mg 人 IgG/mL 樹脂的結合容量

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖包含已共價固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的純化蛋白 A/G 重組融合蛋白。該特殊種類的樹脂可提供通用的色譜特點組合，用于從哺乳動物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學特性適用于許多親和純化系統(tǒng)。

蛋白 A/G 是一種基因工程化蛋白，結合了蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 結合結構域。該融合蛋白在大腸桿菌中表達。蛋白A/G含有蛋白A的四個Fc結合結構域和蛋白G的兩個Fc結合結構域，最終分子量為50,460道爾頓（SDS-PAGE中測得為40至45kDa）。蛋白 A/G 的 pH 值依賴性低于單獨的蛋白 A，但具備蛋白 A 和 G 的累加特性。

蛋白 A/G 可與所有的人 IgG 亞類結合，因此是用于純化尚未確定亞類的多克隆或單克隆 IgG 抗體的理想選擇。此外，它還可結合IgA、IgE、IgM和IgD（后者結合力較弱）。蛋白A/G還可與小鼠所有IgG亞類結合，但不結合小鼠IgA、IgM或血清白蛋白。因此，蛋白A/G是純化和檢測小鼠IgG各亞類單克隆抗體的佳絕選擇，避免了IgA、IgM和小鼠血清白蛋白的干擾。小鼠單克隆的個別亞類與嵌合蛋白 A/G 的親和力很可能強于與蛋白 A 或蛋白 G 的親和力。

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學法制備，該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項優(yōu)勢。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學基團，從而避免了可能導致的非特異性結合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結合。所得的高結合能力樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 A/G。

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖可結合血清、腹水、細胞培養(yǎng)上清液和其他抗體樣品中幾乎所有同種型和哺乳動物物種的 IgG，從而實現(xiàn)高效抗體純化。由于固定化蛋白 A/G 結合了蛋白 A 和蛋白 G 的免疫球蛋白結合結構域，該樹脂可有效進行多種哺乳動物宿主物種中 IgG 抗體的親和純化。

交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性：
•支持 pH 值穩(wěn)定性：2 至 14（短期）；3 至 13（長期）
• 平均粒徑：45 至 165 微米
• 排阻極限：10,000至4,000,000 道爾頓
•體積流速：約1 mL/分鐘（對于1 cm 直徑柱）
•線性速度：30 cm/h
• 壓力：低于 25psi (1.5 bar)；定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降（注：液相色譜裝置的指示表壓可能測量的是總系統(tǒng)壓力，而不是跨色譜柱壓降。）

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 瓊脂糖