• <code id="i6oi8"><delect id="i6oi8"></delect></code>
    <li id="i6oi8"><input id="i6oi8"></input></li>
    <rt id="i6oi8"><acronym id="i6oi8"></acronym></rt>
  • <rt id="i6oi8"><acronym id="i6oi8"></acronym></rt>
    您好,歡迎進(jìn)入上海力敏實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站!
    一鍵分享網(wǎng)站到:
    您現(xiàn)在的位置:首頁 >> 產(chǎn)品中心 >> 生化試劑、抗體、血清 >> 試劑盒 >> 80234Qiagen AllprepFFPE DNA/RNA Kit(50)試劑盒 分子生物試劑

    Qiagen AllprepFFPE DNA/RNA Kit(50)試劑盒 分子生物試劑

    • 更新時(shí)間:  2023-07-27
    • 產(chǎn)品型號(hào):  80234
    • 簡單描述
    • Qiagen AllprepFFPE DNA/RNA Kit(50)試劑盒
      從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中同時(shí)純化基因組DNA和總RNA(包括小RNAs)

      使用小樣本量即可獲得大量純化產(chǎn)物
      在純化同時(shí),保持DNA和RNA的完整性
      高效分離RNA和DNA
      對同一FFPE樣本進(jìn)行全面的DNA和RNA分析
    詳細(xì)介紹

    Qiagen AllprepFFPE DNA/RNA Kit(50)試劑盒



    如要對基因組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行可靠比較,則需從同一樣本中純化DNA和RNA。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織樣本中純化DNA和RNA。純化產(chǎn)物適用于real-time PCR和焦磷酸測序等應(yīng)用。

    從FFPE樣本中純化DNA和RNA。

    [A] 從多個(gè)大鼠FFPE組織樣本中純化基因組DNA并儲(chǔ)存于室溫。使用AllPrep DNA/RNA FFPE Kit或QIAamp DNA FFPE Tissue Kit(專用于從FFPE樣本中純化DNA的試劑盒,作為對照)進(jìn)行純化,兩種試劑盒都含有RNase消化試劑。采用吸光度測定方法檢測每個(gè)20 μm組織切片的DNA產(chǎn)量。[B] 從多個(gè)大鼠FFPE組織樣本中純化RNA并儲(chǔ)存于室溫。使用AllPrep DNA/RNA FFPE Kit或RNeasy FFPE Tissue Kit(專用于從FFPE樣本中純化DNA的試劑盒,作為對照)進(jìn)行純化。采用吸光度測定方法檢測每個(gè)10 μm組織切片的RNA產(chǎn)量。從FFPE組織中純化DNA或RNA時(shí),AllPrep Kit的表現(xiàn)與專用的純化試劑盒表現(xiàn)相當(dāng)。

    對預(yù)擴(kuò)增的cDNA進(jìn)行芯片分析。

    使用AllPrep DNA/RNA FFPE Kit從人類乳腺FFPE組織中純化總RNA。然后使用RT2 FFPE PreAMP技術(shù)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。使用Human Cell Cycle RT2 Profiler PCR Array,通過real-time PCR進(jìn)行基因表達(dá)分析,將腫瘤樣本與非腫瘤樣本進(jìn)行對比。ΔΔCT分析顯示:腫瘤樣本中的基因表達(dá)與非腫瘤樣本的基因表達(dá)存在x倍的差異。

    對FFPE樣本中的DNA和RNA進(jìn)行可靠擴(kuò)增。

    使用AllPrep DNA/RNA FFPE Kit或?qū)S糜趶腇FPE樣本中純化DNA或RNA的試劑盒(QIAamp DNA FFPE Tissue Kit 或RNeasy FFPE Kit,作為對照)從大鼠FFPE組織中純化獲得[A] DNA 和[B]、[C] RNA。在ABI PRISM 7900HT Sequence Detection System上,使用[A] QuantiTect SYBR® Green PCR Kit對78 bp的Prnp基因擴(kuò)增子進(jìn)行Real-time PCR分析,或是用[B]、[C] QuantiTect SYBR® Green RT-PCR Kit對Jun原癌基因表達(dá)進(jìn)行real-time RT-PCR分析。AllPrep Kit和另外兩個(gè)專用試劑盒的CT值相當(dāng),表明三種試劑盒純化DNA或RNA的效率相當(dāng)。[C] 此外,在沒有逆轉(zhuǎn)錄酶(–RT)的條件下分析了Jun基因的表達(dá)。脾臟是富含DNA的組織,其擴(kuò)增曲線平坦,說明純化的RNA中不含基因組DNA。

    AllPrep DNARNA FFPE樣本純化步驟。


    Qiagen AllprepFFPE DNA/RNA Kit(50)試劑盒


    性能
    使用AllPrep DNA/RNA FFPE Kit純化的DNA和RNA的質(zhì)量與使用QIAamp FFPE Tissue Kit和RNeasy FFPE Kit/miRNeasy FFPE Kit純化的產(chǎn)物的質(zhì)量相當(dāng)。因此,純化產(chǎn)物可用于焦磷酸測序、real-time PCR和RT-PCR等下游應(yīng)用。
    原理

    AllPrep DNA/RNA FFPE Kit專為從FFPE樣本中同時(shí)純化基因組DNA和總RNA而設(shè)計(jì)。該試劑盒可使用同一樣本純化DNA和RNA,而非像其他純化方法那樣,需將樣本分為兩份再分別進(jìn)行純化操作。如將樣本分為兩份分別純化DNA和RNA,其純化出的DNA和RNA來自不同的細(xì)胞群落,可能具有不同性質(zhì)特征。從同一樣本中同時(shí)純化DNA和RNA可減少浪費(fèi),因?yàn)镕FPE樣本是十分珍貴的樣本,通常很難恢復(fù)且樣本量少。

    由于固定和包埋,F(xiàn)FPE樣本中的核酸通常都嚴(yán)重片段化,核酸的分子量通常小于從新鮮或冷凍樣本中分離出的核酸的分子量。從同一FFPE樣本中分離DNA和RNA面臨著很大困難:片段化的DNA長度短,且部分是單鏈結(jié)構(gòu);因此其更像RNA,而非完整的DNA。片段化DNA這一特性使得用物理方法分離DNA和RNA十分困難。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,從同一個(gè)FFPE樣本中分別釋放DNA和RNA。

    盡管標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量控制分析(如凝膠電泳或芯片分析方法)無法檢測到甲醛的化學(xué)修飾,但其對酶分析有嚴(yán)重干擾。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit已經(jīng)過優(yōu)化,可zui大程度上逆轉(zhuǎn)甲醛化學(xué)修飾,而不引起DNA和RNA的進(jìn)一步降解。

    操作流程
    簡單的流程可從同一個(gè)樣本中純化高品質(zhì)DNA和RNA。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,從同一個(gè)FFPE樣本中分別釋放DNA和RNA。使用這種方法時(shí),F(xiàn)FPE樣本要在優(yōu)化的裂解緩沖液中孵育,使得RNA釋放出來,而DNA形成沉淀。離心后,將含有RNA的上清和含有DNA的沉淀分別處理,純化RNA和DNA。再次進(jìn)行孵育有一定的解交聯(lián)作用,然后使用RNeasy MinElute或QIAamp MinElute離心柱純化RNA和DNA。用柱上DNA酶處理純化的RNA,以有效去除DNA污染。根據(jù)RNA與離心柱的結(jié)合情況,純化的RNA中可能含有也可能不含miRNA等小RNAs。對于純化后的DNA,可選擇性進(jìn)行柱上RNA酶消化,因?yàn)樵陔x心前的DNA和RNA分離步驟中RNA污染水平已達(dá)到zui低。
    應(yīng)用

    盡管AllPrep DNA/RNA FFPE Kit已經(jīng)過優(yōu)化,可zui大程度上逆轉(zhuǎn)福爾馬林化學(xué)修飾,而不引起DNA和RNA的進(jìn)一步降解;但從FFPE樣本中純化獲得的核酸不應(yīng)該用于需要大分子量DNA或完整長度RNA的下游應(yīng)用。一些應(yīng)用可能需要進(jìn)行化學(xué)修飾后,再使用片段化核酸(如:設(shè)計(jì)PCR和RT-PCR的小擴(kuò)增子)。在cDNA合成中,應(yīng)使用基因特異性引物,而非oligo-dT引物。如果無法使用基因特異性引物,則可使用任意引物。

    特點(diǎn)
    參數(shù)
    ApplicationsPCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
    Elution volumeRNA: 14-30µl ; DNA: 30-100µl
    FormatSpin column
    Main sample typeFFPE tissue samples
    Number of preps per run50
    ProcessingManual (centrifugation)
    Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinRNA (miRNA) and DNA
    Sample amountmax. 4*10 µm sections or 2*20 µm sections
    TechnologySilica technology
    Time per run or per prep6h for 10 samples, including sectioning
    YieldVaries




    留言框

    • 產(chǎn)品:

    • 您的單位:

    • 您的姓名:

    • 聯(lián)系電話:

    • 常用郵箱:

    • 省份:

    • 詳細(xì)地址:

    • 補(bǔ)充說明:

    • 驗(yàn)證碼:

      請輸入計(jì)算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7
    友情鏈接: 等離子去膠機(jī)       電液伺服萬能材料試驗(yàn)機(jī)       電液伺服液壓萬能試驗(yàn)機(jī)       電子拉伸萬能試驗(yàn)機(jī)       材料拉伸試驗(yàn)機(jī)       金剛石鉆孔機(jī)       北斗定位器       控溫式遠(yuǎn)紅外消煮爐       切膠儀       無塵紙       金屬液氮冷凍箱       傳力接頭       磁座鉆       LEM電壓傳感器       鋁儲(chǔ)罐      
    久久香蕉国产线看精品| 久久777国产线看观看精品| 久久久久久无码国产精品中文字幕 | 亚洲精品9999久久久久无码| 人人狠狠综合久久亚洲高清| 亚洲精品乱码久久久久久久久久久久| 久久亚洲春色中文字幕久久久| 精品午夜久久网成年网| 伊人久久大香线蕉免费视频| 91偷偷久久做嫩草电影院| 亚洲精品美女久久久久99小说| 久久一日本道色综合久久m| 狠狠久久精品中文字幕无码| 久久久久人妻一区二区三区vr| 国产ww久久久久久久久久| 性高湖久久久久久久久| 久久99毛片免费观看不卡| 亚洲午夜无码AV毛片久久| 久久精品国产72国产精| 久久成人免费大片| 少妇高潮喷潮久久久影院 | 囯产精品久久久久久久久久妞妞| 色妞色综合久久夜夜| 九九久久精品无码专区| 精品蜜臀久久久久99网站| 久久中文字幕2021精品| 国产∨亚洲V天堂无码久久久| 热re久久精品国产99热| 久久精品中文字幕大胸| 久久精品视频网站| 国产亚洲婷婷香蕉久久精品| 久久午夜福利电影| 久久精品无码一区二区三区日韩| 亚洲国产成人乱码精品女人久久久不卡 | 国产做a爰片久久毛片a| 久久久久亚洲av无码专区喷水| 久久精品国产一区二区三区肥胖| 97久久婷婷五月综合色d啪蜜芽| 久久狠狠一本精品综合网| 久久露脸国产精品| 久久影院亚洲一区|